کلونینگ ژن چیست

کلونينگ فرآيندي است که طي آن توالي مشخصي از ژنوم را جداسازي مي‌کنند و با ادغام آن در یک DNA هدف، نسخه‌هاي يکساني از ژنوم را در محيط طبيعي ( سلول يا بافت زنده ) تکثیر می نمایند. هدف از ژن کلونينگ فراهم کردن نسخه‌هاي متعدد از يک ژن منفرد است که در حوزه‌هاي مختلف تحقيقاتي مورد استفاده است. به علاوه داراي کاربردهاي پزشکي از قبيل ژن درماني و کاربردهاي صنعتي نظير توليد مقدار زيادي از يک پروتئين مي‌باشد.

کلونينگ ژن به روش‌هاي مختلفي صورت مي‌گيرد در گذشته اساس اکثر روش‌های کلونینگ به اين صورت است که DNA هدف از سلول دهنده استخراج مي‌شود و با کمک آنزيم‌هاي محدودگر برش داده مي‌شود و به داخل يک مولکول DNA حلقوي که معمولاً يک پلاسميد است و نقش ناقل ( وکتور ) را دارد، وارد مي‌شود. به اين ترتيب يک مولکول  DNA نوترکيب ساخته مي‌شود به این روش کلونینگ بر اساس آنزیم های محدودگر گفته می شود.

روش های جدید در کلون نمودن ژن ها و توالی ها

امروز علاوه بر روش کلونینگ بر اساس آنزیم های محدودگر چند روش جدید بر اساس سیستم‌ها نوترکیبی و وجود توالی های همپوشان بین توالی DNA هدف و وکتورها کشف شده اند. روش‌های کلون نمودن توالی ها در وکتورها و حتی اتصال قطعات خطی به یکدیگر شامل مراحل زیر می شود:

1. روش کلونینگ با استفاده از آنزیم های محدودگر
2. روش infusion cloning
3. روش gatway cloning
4. روش Gibson
5. روش NEBuilder® HiFi